Biotin-L-Cysteine,生物素-L-半胱氨酸(Biotin-Cys) 是將維生素H生物素通過共價偶聯連接到L-半胱氨酸上制成的雙功能化分子,兼具生物素的高親和力結合能力與半胱氨酸巰基(-SH)的化學活性,主要用于科研領域的蛋白質修飾、納米材料功能化及分子識別研究。
基本信息
英文名:Biotin-L-Cysteine / Biotin-Cys / Biotinyl-L-Cysteine
偶聯方式:生物素的羧基端與L-半胱氨酸的α-氨基通過酰胺鍵連接,半胱氨酸的側鏈巰基(-SH)保持游離可用狀態。常用EDC/NHS催化活化體系,在弱酸性(pH 5–6)、無水、避光條件下進行,經反相層析純化。也可通過PEG鏈連接形成Biotin-PEG-Cys,提供更好的水溶性和柔性空間。
外觀:白色至淡黃色固體粉末
純度:≥95%
保存條件:-20°C以下,嚴格避光,干燥密封,惰性氣體保護,避免反復凍融,有效期約12個月
規格:常見25 mg / 50 mg / 100 mg / 500 mg,支持定制
理化特性
溶解性:純水中溶解度約10–20 mg/mL;易溶于DMSO、DMF(可達50 mg/mL);在PBS緩沖液(pH 7.4)中可全溶解,溶解度約20–30 mg/mL。
化學穩定性:最適pH 6.0–8.0,最適溫度37°C;4–10°C下穩定,10°C儲存7天活性下降≤5%;pH<3時酰胺鍵可能水解,pH>10時生物素環結構可能開環;巰基在中性和弱堿性溶液中易被空氣氧化為二硫鍵(形成Biotin-Cystine),需現配現用或充氮保存。
巰基活性:這是Biotin-Cys區別于其他生物素標記氨基酸(如Biotin-L-Threonine)的核心優勢。游離-SH可參與Michael加成反應、形成二硫鍵、與金屬離子(Ag?、Hg?、Cu?等)螯合,也可與馬來酰亞胺、碘乙酰胺等發生特異性共價結合,是多功能化學修飾的理想接頭。
生物素-親和素結合能力:保留完整的生物素結合位點,可與鏈霉親和素(Streptavidin)或親和素(Avidin)以較高親和力結合(Kd約10?1? M),實現信號放大與靶向捕獲。
主要應用方向
蛋白質巰基特異性標記:利用游離-SH與蛋白質表面半胱氨酸殘基發生二硫交換或Michael加成,實現蛋白質的位點特異性生物素化,再通過鏈霉親和素系統進行富集、檢測或固定。相比隨機氨基標記,巰基標記更具選擇性。
納米材料功能化:巰基可與金納米粒子、量子點等發生Au-S共價結合,同時生物素端提供鏈霉親和素橋接能力,構建多層納米組裝體,用于靶向遞送、生物傳感等。
表面修飾與微陣列制備:在芯片、傳感器、玻片表面通過巰基自組裝單層膜(SAM)固定分子,生物素端用于捕獲鏈霉親和素偶聯的探針,廣泛用于蛋白質微陣列和生物傳感器構建。
金屬離子檢測與螯合:巰基對重金屬離子(Hg2?、Pb2?、Cd2?等)有強螯合能力,結合生物素-親和素信號放大,可用于環境或生物樣本中痕量重金屬的檢測。
藥物遞送系統構建:作為雙功能連接臂,一端連接藥物/納米載體(通過巰基),另端連接生物素化靶向配體(如生物素化抗體),實現靶向遞送。
流式細胞術與Western Blot:通過鏈霉親和素-HRP/熒光二抗系統,定量檢測蛋白質巰基暴露水平或還原狀態。
實驗注意事項
巰基極易氧化,全程需避光操作,建議充氮氣或氬氣保存?,F配現用為佳,DMSO儲備液(10–50 mM)稀釋至工作濃度。常用實驗濃度約10–500 μM。pH 6.5–8.0環境下穩定。僅限科研使用,不可用于人體。
Biotin-L-Cysteine,生物素-L-半胱氨酸
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