Biotin-L-Threonine，生物素-L-蘇氨酸是將維生素H生物素通過化學偶聯連接到L-蘇氨酸上制成的生物素標記氨基酸衍生物，主要用于生物素-親和素系統中追蹤L-蘇氨酸的攝取、轉運及代謝過程。
基本信息
英文名：Biotin-L-Threonine / Biotinyl-L-Threonine / N-(+)-Biotinyl-L-Threonine
偶聯方式：生物素的羧基與L-蘇氨酸的氨基（或羥基，取決于標記位點）通過酰胺鍵或酯鍵連接，常用EDC/NHS催化活化，經柱層析純化。標記位點通常在L-蘇氨酸的α-氨基上，保留游離羧基和側鏈羥基。
外觀：白色至淡黃色固體粉末
純度：≥95%
保存條件：-20°C以下，干燥密封，避光保存，避免反復凍融，有效期約12個月
規格：常見25 mg / 50 mg / 100 mg / 500 mg，支持定制
理化特性
溶解性：純水中溶解度約10–20 mg/mL；易溶于DMSO、DMF（可達50 mg/mL）；在PBS緩沖液（pH 7.4）中可全溶解，溶解度約20–30 mg/mL。
化學穩定性：最適pH 6.0–8.0，最適溫度37°C；4–10°C下穩定，10°C儲存7天活性下降≤5%；pH<3時酰胺鍵可能水解，pH>10時生物素環結構可能開環；避免強氧化劑環境。
生物素-親和素結合能力：保留完整的生物素結合位點，可與鏈霉親和素（Streptavidin）或親和素（Avidin）以較高親和力結合（Kd約10?1? M），這是該探針的核心功能——通過生物素-親和素橋接實現信號放大與靶向捕獲。
手性保持：使用L-構型蘇氨酸，保留天然氨基酸的立體化學特性，可被細胞氨基酸轉運體正常識別與攝取。
主要應用方向
氨基酸轉運研究：L-蘇氨酸是人體必需氨基酸，參與蛋白質合成、甘氨酸代謝及免疫調節。生物素標記后可通過鏈霉親和素-HRP/熒光二抗系統，定量檢測細胞對L-蘇氨酸的攝取效率、轉運速率及競爭性抑制，明確LAT1/LAT2等轉運體的底物特異性。
代謝通路追蹤：追蹤L-蘇氨酸在細胞內的代謝去向——進入蛋白質合成池、轉化為甘氨酸/乙酰CoA、或參與一碳單位代謝，輔助研究氨基酸代謝異常相關疾病。
蛋白質組學親和捕獲：利用生物素-鏈霉親和素系統，從細胞裂解液中親和純化與L-蘇氨酸代謝相關的酶蛋白（如蘇氨酸脫氫酶、蘇氨酸脫羧酶），輔助蛋白質互作研究。
Western Blot檢測：作為生物素化底物，通過鏈霉親和素-HRP檢測特定蛋白的蘇氨酸磷酸化修飾（需配合抗磷酸化抗體或質譜驗證）。
ELISA與免疫檢測：生物素標記的氨基酸可作為競爭抑制劑，用于ELISA中定量檢測樣本中游離L-蘇氨酸濃度，靈敏度可達ng/mL級別。
組織化學定位：結合鏈霉親和素-熒光偶聯物，在組織切片中定位L-蘇氨酸在特定組織（如肝臟、腦、腸道）中的分布。
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