一、基本信息

LDS 751，全稱2-[4-[4-(二甲氨基)苯基]-1,3-丁二烯基]-3-乙基苯并噻唑鎓高氯酸鹽，CAS號(hào)181885-68-7，分子式C??H??ClN?O?，分子量471.98。外觀為深綠色至黑色固體粉末，純度通常≥95%。它是一種細(xì)胞膜通透性核酸染色劑，屬于苯乙烯基吡啶鎓（Styrylpyridinium）染料家族。

二、特點(diǎn)

光譜特性：與雙鏈DNA（dsDNA）結(jié)合后，最大激發(fā)波長(zhǎng)約543 nm，但可用488 nm激光線很好地激發(fā)。最大發(fā)射波長(zhǎng)約712 nm（遠(yuǎn)紅/近紅外區(qū)域），是DRAQ 5的替代品，特別適合多色分析，與FITC、PE等常用熒光通道串色極小。

熒光增強(qiáng)：與dsDNA結(jié)合后熒光信號(hào)增強(qiáng)約20倍，游離態(tài)熒光很弱，信噪比高。

線粒體靶向：這是LDS 751最特殊的性質(zhì)。它在活細(xì)胞中不進(jìn)入細(xì)胞核，而是優(yōu)先與線粒體的極化膜結(jié)合。因此它不能用作細(xì)胞核DNA染料，但可以作為線粒體膜電位和線粒體DNA的指示劑。

P-糖蛋白底物：LDS 751是P-糖蛋白（P-gp）的已知底物，可用于研究多藥耐藥蛋白的藥物結(jié)合位點(diǎn)和轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。

三、主要應(yīng)用

有核細(xì)胞與無(wú)核細(xì)胞分離：由于不進(jìn)入細(xì)胞核，LDS 751可用于流式細(xì)胞術(shù)中區(qū)分紅細(xì)胞/血小板（無(wú)核，不著色）與有核白細(xì)胞（著色），也可分離網(wǎng)織紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞。

多色流式分析：712 nm的長(zhǎng)波長(zhǎng)發(fā)射使其與常用熒光染料光譜分離良好，適合高參數(shù)流式和共聚焦成像。

線粒體研究：利用其線粒體靶向特性，結(jié)合噻唑橙（RNA染料，綠色熒光）可同時(shí)區(qū)分網(wǎng)織紅細(xì)胞（含RNA和線粒體）與其他細(xì)胞群。

P-糖蛋白研究：作為P-gp的熒光底物，用于研究藥物轉(zhuǎn)運(yùn)、多藥耐藥性和藥物結(jié)合位點(diǎn)。

細(xì)菌吞噬實(shí)驗(yàn)：可用于標(biāo)記中性粒細(xì)胞，與GFP標(biāo)記的細(xì)菌配合進(jìn)行吞噬實(shí)驗(yàn)的流式分析。

四、存儲(chǔ)與實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

存儲(chǔ)條件：-20°C以下、避光、干燥、密封保存，建議充惰性氣體。溶液狀態(tài)不穩(wěn)定，需現(xiàn)用現(xiàn)配。

溶解方式：用DMSO配制成5-10 mM儲(chǔ)存液，分裝后-20°C或-80°C避光保存，避免反復(fù)凍融。工作濃度通常1-10 μM。

使用濃度：1-10 μM，需根據(jù)細(xì)胞類型預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致非特異性染色。

避免光漂白：全程避光操作，染色后盡快檢測(cè)。

關(guān)鍵提醒：LDS 751不染細(xì)胞核，不可用于細(xì)胞核DNA定量或細(xì)胞周期分析。如需核染色，應(yīng)選DRAQ 5、PI或Hoechst等染料。

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