一、基本信息

NeurotransGreen C，中文名N-(3-三乙基銨丙基)-4-(4-(二丁基氨基)苯乙烯基)吡啶二溴鹽，CAS號149838-22-2。外觀為深紅色固體粉末，純度通?！?5%。它與NeurotransRed同屬苯乙烯基吡啶鎓（Styrylpyridinium）染料家族，是FM1-43、FM4-64的同系列產(chǎn)品，專為綠色熒光通道設(shè)計。

二、作用原理

NeurotransGreen C本身游離態(tài)熒光極弱，當(dāng)它嵌入神經(jīng)末梢的細(xì)胞膜后，熒光量子產(chǎn)率大幅增強(qiáng)。其熒光強(qiáng)度與膜電位變化和突觸小泡循環(huán)密切相關(guān)：靜息狀態(tài)下熒光較低，當(dāng)神經(jīng)末梢去極化、突觸小泡與細(xì)胞膜融合釋放神經(jīng)遞質(zhì)時，染料隨膜內(nèi)吞進(jìn)入突觸小泡，熒光強(qiáng)度顯著上升。因此可以實時、直觀地跟蹤突觸小泡的內(nèi)吞-外排循環(huán)和神經(jīng)遞質(zhì)的釋放與回收全過程。

三、特點

第一，綠色熒光，光譜分離優(yōu)勢明顯。與紅色版本NeurotransRed配對使用時，可在同一實驗中同時監(jiān)測兩個不同的突觸位點或進(jìn)行多色成像，與常用的紅色熒光染料（如DiI、TRITC）光譜重疊極小。

第二，可逆標(biāo)記。染料可隨突觸小泡循環(huán)反復(fù)使用，適合長時間動態(tài)觀察，不會因不可逆結(jié)合而耗盡信號。

第三，膜電位敏感性強(qiáng)。熒光信號直接反映突觸活動，靈敏度高，可實時監(jiān)測。

第四，特異性好。主要標(biāo)記活躍的突觸部位，非活性區(qū)域背景低。

四、主要應(yīng)用

神經(jīng)肌肉接頭研究：在活體或離體標(biāo)本上實時觀察運(yùn)動神經(jīng)末梢的突觸小泡釋放和回收過程，研究突觸傳遞動力學(xué)。

活神經(jīng)元神經(jīng)遞質(zhì)實時檢測：監(jiān)測谷氨酸等興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的釋放與攝取動態(tài)，研究突觸傳遞機(jī)制。

突觸可塑性研究：監(jiān)測長時程增強(qiáng)（LTP）或長時程抑制（LTD）過程中突觸活動的變化。

藥物篩選與生物傳感器開發(fā)：評估藥物對突觸傳遞的影響，也可用于高通量篩選和生物傳感器構(gòu)建。

五、存儲與實驗注意事項

存儲條件：-20°C以下、避光、干燥、密封保存，建議充惰性氣體保護(hù)。避免反復(fù)凍融。

溶解方式：用DMSO或無水乙醇配制成儲存液（如1-5 mM），-20°C避光保存，使用前用生理緩沖液稀釋至工作濃度（通常1-10 μM）。

使用濃度：工作濃度一般為1-10 μM，需根據(jù)實驗體系優(yōu)化。反應(yīng)體系中DMSO濃度不超過5%-10%。

避免光漂白：全程避光操作，減少光照時間。

緩沖液選擇：避免使用含伯胺的緩沖液（如Tris），推薦使用生理鹽水或HEPES緩沖液。

避免頻繁溶解凍干：以減緩熒光淬滅。

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