Biotin-SS-NH2，生物素-二硫鍵-氨基

生物素-二硫鍵-氨基是一種異雙功能可裂解交聯試劑，由三部分組成：生物素端、二硫鍵（-S-S-）連接臂和氨基端（-NH?）。它兼具生物素的高親和力識別能力、二硫鍵的還原響應可斷裂特性以及氨基端的廣泛偶聯活性，是蛋白質標記、親和純化和可控釋放研究中較常用的雙功能接頭試劑之一。

外觀為白色至淡黃色粉末，純度≥95%，需在-20℃以下避光、干燥保存，保質期約1年。溶于DMSO、DMF、乙醇等有機溶劑，水溶液中需現配現用。

基本組成

生物素端可與鏈霉親和素（Streptavidin）或親和素（Avidin）以較高親和力（Kd≈10?1? M）特異性結合，實現分子捕獲與信號放大。二硫鍵連接臂是核心設計亮點，在還原性環境中（如細胞內高濃度谷胱甘肽GSH或外加還原劑DTT、TCEP）可被特異性斷裂，實現生物素標簽的可控脫落與釋放。氨基端（-NH?）可與羧基（-COOH）、NHS酯、異硫氰酸酯、醛基等活性基團發生偶聯反應，適用于標記蛋白質、抗體、多肽、納米材料等多種生物分子。

光學與化學特性

無熒光特性，本身不發光，需配合熒光標記的鏈霉親和素或后續熒光檢測體系使用。二硫鍵在氧化環境中穩定，在還原環境中快速斷裂，斷裂條件溫和（如10 mM DTT，37℃，30分鐘即可全斷裂），具有良好的生物正交性和可控性。

核心功能

生物素端提供較強親和捕獲能力，可實現目標分子的高效富集與檢測。二硫鍵提供可控釋放功能，標記后可在需要時通過還原處理將生物素標簽脫落，釋放出原始目標分子，特別適合需要后續回收或釋放活性分子的實驗場景。氨基端提供廣泛的偶聯活性，可靈活連接各類含羧基或活性酯的生物分子。

主要應用

一是可裂解親和純化，標記目標蛋白后通過鏈霉親和素柱純化，再用還原劑斷裂二硫鍵洗脫，獲得高純度且無標簽殘留的目標蛋白。

二是可控釋放研究，在藥物遞送或納米載體領域，利用還原響應二硫鍵實現 cargo 的可控釋放。

三是蛋白質組學與互作研究，標記后捕獲蛋白復合物，還原后釋放進行質譜分析。四是細胞表面標記與釋放，標記細胞表面蛋白后通過還原處理實現可控脫落，研究蛋白功能。

使用建議

常用溶劑為DMSO、DMF，現配現用。氨基端偶聯反應一般在pH 7.5–8.5的PBS或碳酸鹽緩沖液中進行，反應時間30分鐘至2小時。二硫鍵斷裂常用10–50 mM DTT或5–10 mM TCEP，37℃處理15–60分鐘。全程需避光操作，避免反復凍融，建議分裝保存。

注意事項

僅供科研使用，不可用于人體實驗或臨床治療。操作時避免與皮膚和眼睛直接接觸，遵守實驗室安全操作規程。二硫鍵對氧化敏感，需在惰性氣體保護下保存和使用。

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