PC Biotin-PEG3-alkyne 的制備方法

PC 即 Photocleavable（光可裂解），指生物素部分含光裂解基團，365 nm 紫外光照射下可釋放捕獲的生物分子。CAS號：1869922-24-6，分子量 780.89，純度通常 ≥95%。

制備方法

方法一：經典酰胺偶聯法

第一步，PC-生物素羧基用 EDC/NHS 活化，生成 PC-生物素-NHS 酯，pH 6.5–7.5，室溫，DMF中。第二步，PC-生物素-NHS 酯與 H?N-PEG3-alkyne 在 pH 7.0–8.0 緩沖液中偶聯，生成酰胺鍵，室溫反應 4–12 小時。第三步，C18 反相柱層析或 HPLC 純化，真空干燥。總收率 55–75%。

方法二：NHS 碳酸酯法

PC-生物素與雙琥珀酰亞胺碳酸酯（DSC）反應生成 NHS 碳酸酯中間體，再與 H?N-PEG3-alkyne 偶聯生成氨基甲酸酯鍵。優點是副反應少、不易消旋。

方法三：點擊化學后接法

先用 PC-生物素-NHS 酯與 H?N-PEG3-N? 偶聯得到 PC-Biotin-PEG3-azide，再通過丙炔酸對末端進行炔基化。適合同時制備 azide/alkyne 兩種產品的實驗室。

方法四：固相合成法

以 Wang 樹脂為載體，從 C 端向 N 端逐步偶聯炔基丙氨酸、PEG3 單元、PC-生物素，最后 TFA 切割、HPLC 純化。適合快速構建類似物庫，但成本高。

關鍵控制點

全程避光，PC 基團對紫外光敏感。溫度控制在 0–30℃，重氮/光裂解基團熱穩定性差。溶劑用無水 DMF 或 DMSO，水會導致 NHS 酯水解。pH 保持 7.0–8.5，過低 NHS 酯水解，過高生物素脲基環開環。氮氣保護，末端炔基易氧化。必須 HPLC 純化，去除未反應的 PC-生物素。

重要提示

僅供科研使用，不可用于人體。全程避光操作，DMSO 溶解后現配現用，避免反復凍融。廢液按有毒化學廢棄物處理。

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溫馨提示：供應產品僅用于科研，不能用于人體！

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