Biotin-N-e-Acetyl-L-Lysine 是一種將生物素(Biotin)與 Nε-乙酰化賴氨酸(N-e-Acetyl-L-Lysine)通過共價鍵連接形成的化合物,結合了生物素與賴氨酸衍生物的特性,在生物醫學研究和生物技術領域具有重要應用價值。
一、化學結構與特性
生物素部分:生物素是一種小分子維生素(維生素H),具有噻吩環與尿素結合的核心結構及戊酸側鏈。它能夠與親和素或鏈霉親和素特異性結合,這種結合具有較高的親和力(結合常數達101? M?1),使得生物素標記的分子在生物檢測中具有高靈敏度和特異性。
Nε-乙酰化賴氨酸部分:賴氨酸是一種帶有氨基和羧基的必需氨基酸。Nε-乙酰化賴氨酸是賴氨酸的乙酰化衍生物,其側鏈氨基被乙酰基修飾。這種修飾可以影響賴氨酸的電荷性質和空間構象,進而改變其參與的生物化學反應和蛋白質功能。
連接方式:生物素與Ne-乙酰化賴氨酸通常通過生物素戊酸側鏈的羧基與賴氨酸的ε-氨基形成穩定的酰胺鍵連接。
二、物理性質
外觀:通常為白色至類白色固體。
溶解性:具有良好的水溶性,也可溶于二甲基亞砜(DMSO)等有機溶劑。在生理條件下穩定,不易降解,能長時間保持生物活性。
穩定性:在-20°C下避光保存,可以保持較長時間的穩定性。避免反復凍融,未用溶液需分裝冷凍。
三、合成方法
化學合成法:利用EDC/NHS等偶聯試劑活化生物素的羧基,使其與賴氨酸的氨基在溫和條件下發生酰胺化反應,形成穩定的生物素-賴氨酸偶聯物。
酶催化法:通過特定酶(如連接酶)催化生物素與賴氨酸的偶聯反應。這種方法具有高特異性和選擇性,能減少副產物生成,適用于對純度要求較高的科研場景。
生物正交合成法:針對同位素標記或修飾的生物素-賴氨酸(如13C/1?N標記),采用生物正交反應(如點擊化學)在不干擾生物體內其他反應的前提下完成偶聯。這種方法可用于追蹤蛋白質動態修飾過程。
四、應用領域
生物標記與分子檢測:
可標記抗體、酶或細胞表面蛋白,結合熒光標記的鏈霉親和素,用于Western Blot、ELISA、免疫沉淀及熒光成像等實驗,提升檢測靈敏度與特異性。
構建生物傳感器,利用生物素-親和素的高親和力實現對微量生物分子的精準檢測,在疾病早期診斷中具有潛力。
蛋白質組學研究:
同位素標記的生物素-賴氨酸可輔助質譜分析,解析蛋白質翻譯后修飾位點,繪制修飾圖譜。
研究蛋白質酰化過程,如乙酰化、琥珀酰化等,揭示這些修飾對蛋白質功能的影響。
生物醫學研究工具:
整合到膠原蛋白等生物材料中構建仿生支架,通過梯度修飾親和素結合蛋白,實現生長因子的有序分布,加速神經、皮膚等損傷組織的修復。
作為研究工具,用于探索生物素-賴氨酸在細胞信號傳導、代謝調控等生物過程中的作用機制。
Biotin-N-e-Acetyl-L-Lysine
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