DADPS-生物素-炔基(DADPS Biotin Alkyne)的具體用途
2026-05-20
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CAS:2241685-22-1 | 分子量:827.12 | 分子式:C??H??N?O?SSi
該試劑的核心價值在于:消除了傳統鏈霉親和素-生物素親和純化中"標記后無法溫和釋放"的最大痛點,同時兼具點擊化學偶聯能力。以下是六大具體用途:
一、可裂解親和純化
整個流程分為三步:
第一步,標記。炔基通過點擊化學(CuAAC反應)與疊氮修飾的目標蛋白偶聯,高效且專一。
第二步,捕獲。生物素端與鏈霉親和素柱結合,富集目標蛋白。
第三步,釋放。用10%甲酸處理0.5小時,DADPS接頭在溫和酸性條件下斷裂,釋放出原始目標蛋白。釋放后僅留下84.12 Da的小分子片段,幾乎不影響蛋白功能,可獲得無標簽殘留的高純度目標蛋白。這是傳統生物素純化(需煮沸SDS或強變性條件)全無法做到的。
二、蛋白質組學研究
在復雜樣品(如細胞裂解液、血清)中,通過點擊反應標記低豐度蛋白,再利用生物素-親和素系統特異性捕獲。DADPS酸解釋放后可直接進行質譜鑒定,大幅提高低豐度蛋白的檢測靈敏度。特別適合蛋白質互作研究(Pull-down)和翻譯后修飾分析。
三、生物分子標記與點擊化學偶聯
針對不同標記對象,炔基均可與疊氮基團通過CuAAC反應高效偶聯:
標記蛋白質時,炔基與疊氮修飾蛋白反應,用于蛋白質熒光標記和固定化。
標記核酸時,炔基與疊氮修飾核酸反應,用于核酸探針構建和FISH。
標記細胞表面受體時,炔基與代謝標記的疊氮糖反應,通過SPAAC實現活細胞表面分子標記。
標記藥物分子時,炔基與疊氮藥物反應,用于藥物-生物素偶聯物的制備。
四、藥物遞送與ADC研究
作為智能連接子用于制備抗體-藥物偶聯物(ADC)。炔基與藥物分子的疊氮基團點擊偶聯,生物素端用于后續親和純化以提高ADC產品純度。同時利用DADPS的酸敏感可裂解特性,在腫瘤微環境(弱酸性pH)下實現藥物的靶向可控釋放,有效降低系統毒性。
五、活細胞成像與流式細胞術
通過無銅點擊化學(SPAAC)在活細胞內標記靶標分子(膜蛋白、核酸等),避免銅離子的細胞毒性。再利用親和素-熒光探針(如Streptavidin-FITC)實現成像。DADPS的化學穩定性確保標記分子在成像過程中不降解,保證信號持續性。在流式細胞術中可用于細胞表面標志物的高靈敏度檢測。
六、納米材料功能化
將DADPS-Biotin-Alkyne通過點擊化學連接至疊氮修飾的納米載體(脂質體、聚合物納米粒、金納米粒子等)表面,實現納米材料的靶向遞送與可控釋放雙重功能。生物素端還可進一步連接靶向配體(如抗體、多肽),構建多功能納米平臺。
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