Biotinyl Cystamine有哪些用途呢
2026-05-17
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Biotinyl Cystamine(生物素半胱胺,CAS: 128915-82-2)是一種集生物素超高親和力標(biāo)記與二硫鍵可逆交聯(lián)特性于一體的多功能試劑,在生物化學(xué)、分子生物學(xué)、化學(xué)修飾及藥物研發(fā)等領(lǐng)域有著廣泛的用途。
一、蛋白質(zhì)標(biāo)記與交聯(lián)
其半胱胺部分含有可反應(yīng)的氨基和二硫鍵,可通過兩種方式實現(xiàn)蛋白質(zhì)標(biāo)記:一是利用末端氨基與蛋白質(zhì)上的羧基或NHS酯等活性基團反應(yīng),將生物素引入蛋白質(zhì);二是利用二硫鍵與含巰基(-SH)的蛋白質(zhì)發(fā)生二硫鍵交換反應(yīng),實現(xiàn)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的共價交聯(lián)。交聯(lián)后的產(chǎn)物可通過加入還原劑(如DTT或TCEP)斷裂二硫鍵,實現(xiàn)目標(biāo)蛋白的可控釋放,這一特性在需要回收活性蛋白的實驗中非常有價值。
二、親和純化與免疫沉淀
利用生物素與鏈霉親和素(Streptavidin)之間較強的非共價結(jié)合力(Kd≈10?1? M),Biotinyl Cystamine標(biāo)記的目標(biāo)分子可以被鏈霉親和素包被的磁珠、瓊脂糖珠等固相材料高效捕獲。這使其廣泛應(yīng)用于免疫沉淀(IP)、pull-down實驗、親和層析等技術(shù)中,用于從復(fù)雜樣品(如細胞裂解液、血清)中富集和純化特定蛋白質(zhì)或核酸。
三、可控釋放與可逆標(biāo)記
其二硫鍵在還原性環(huán)境(如DTT、TCEP或細胞內(nèi)高濃度谷胱甘肽)中可斷裂,從而釋放已標(biāo)記或已交聯(lián)的分子。這一特性使其特別適用于:可控藥物遞送系統(tǒng)(在細胞內(nèi)還原環(huán)境中釋放藥物)、可逆交聯(lián)實驗(先交聯(lián)后按需解離)、以及需要回收活性分子的純化流程。
四、核酸與小分子標(biāo)記
Biotinyl Cystamine可與經(jīng)巰基修飾的核酸或小分子偶聯(lián),實現(xiàn)高效生物素化標(biāo)記。標(biāo)記后的核酸可用于基因芯片、原位雜交(ISH)、核酸純化等實驗;標(biāo)記的小分子可用于生物傳感探針制備、分子捕獲及化學(xué)生物學(xué)研究。
五、細胞表面蛋白標(biāo)記與生物成像
Biotinyl Cystamine可用于標(biāo)記細胞表面蛋白,再通過熒光標(biāo)記的鏈霉親和素進行檢測,實現(xiàn)熒光顯微鏡成像、共聚焦顯微鏡觀察及超分辨成像。由于PEG化版本或雙生物素版本(Bis-Biotinyl Cystamine)具有更強的信號和更高的穩(wěn)定性,在生物成像領(lǐng)域應(yīng)用尤為廣泛。
六、ELISA與免疫檢測
在酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)和免疫印跡(Western Blot)中,Biotinyl Cystamine可作為連接抗體與檢測信號的橋梁。生物素端結(jié)合目標(biāo)分子,鏈霉親和素-HRP等檢測系統(tǒng)識別生物素端,從而放大檢測信號,提高靈敏度和特異性。也可用于流式細胞術(shù)中的細胞表面標(biāo)記與分析。
七、納米材料與生物傳感器功能化
Biotinyl Cystamine可用于修飾納米顆粒、微球、芯片等材料表面。生物素端提供靶向識別能力(如靶向表達生物素受體的腫瘤細胞),半胱胺端可負載藥物、熒光探針或傳感器分子,實現(xiàn)靶向藥物遞送、環(huán)境響應(yīng)型檢測及生物傳感器構(gòu)建。通過交聯(lián)固定酶分子,還可提高生物催化劑的穩(wěn)定性。
八、蛋白質(zhì)組學(xué)研究
在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,Biotinyl Cystamine可用于標(biāo)記和富集特定蛋白質(zhì),結(jié)合質(zhì)譜分析實現(xiàn)蛋白質(zhì)的鑒定和定量。其可逆交聯(lián)特性還可用于動態(tài)蛋白質(zhì)相互作用研究,幫助解析蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成和功能。
九、藥物研發(fā)與智能遞送
在藥物研發(fā)領(lǐng)域,Biotinyl Cystamine可作為藥物載體的功能化模塊。生物素端可靶向結(jié)合特定細胞(如某些高表達生物素受體的腫瘤細胞),二硫鍵在細胞內(nèi)還原環(huán)境中斷裂后釋放藥物,實現(xiàn)靶向輸送和智能釋放,從而提高藥物療效并降低副作用。
十、雙生物素版本的特殊用途
其雙生物素版本(Bis-Biotinyl Cystamine,CAS: 135075-40-0)具有兩個生物素分子,與鏈霉親和素的結(jié)合更牢固,標(biāo)記穩(wěn)定性更高,常用于需要較強錨定能力的場景,如高靈敏度ELISA、蛋白質(zhì)交聯(lián)固定、以及納米顆粒表面的高密度功能化。
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