BHQ-3 azide,BHQ-3疊氮的特點
2026-05-07
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BHQ-3 azide 是一種高效的熒光淬滅劑,屬于 Black Hole Quencher (BHQ) 系列,其分子末端修飾有疊氮基團(-N?),賦予其良好的化學(xué)修飾能力,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、化學(xué)生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。
化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
分子式:C??H??N??O?
分子量:629.79
外觀:深紫色至黑色固體粉末
溶解性:易溶于極性有機溶劑(如 DMSO、DMF),在水中的溶解性相對較差,但在某些水性緩沖液體系中可通過適當(dāng)處理(如添加表面活性劑或助溶劑)達(dá)到一定程度的溶解。
穩(wěn)定性:在干燥、避光、低溫條件下穩(wěn)定,可長期儲存;溶液狀態(tài)需盡快使用以避免疊氮基團降解。
結(jié)構(gòu)式:
主要應(yīng)用
熒光探針設(shè)計:
分子信標(biāo)(Molecular Beacons):BHQ-3 azide 常用于標(biāo)記分子信標(biāo)的 3' 或 5' 末端,與熒光報告基團(如 FAM、Cy5)形成 FRET 對。當(dāng)探針處于未結(jié)合狀態(tài)時,熒光被淬滅;當(dāng)探針與靶序列結(jié)合后,構(gòu)象改變導(dǎo)致熒光恢復(fù),實現(xiàn)信號的“開/關(guān)"調(diào)控。
FRET 探針:在 TaqMan 探針、分子信標(biāo)等設(shè)計中,BHQ-3 azide 作為淬滅基團,與熒光染料配對,實現(xiàn)靶序列擴增的實時監(jiān)測。由于淬滅效率高,可有效降低背景信號,提高定量精度。
可控激活探針:通過設(shè)計特定的酶切位點或化學(xué)響應(yīng)基團,實現(xiàn)熒光信號的動態(tài)調(diào)控,適用于酶活性檢測、核酸剪切等生物事件的實時監(jiān)測。
實時定量 PCR(qPCR):
BHQ-3 azide 作為探針的淬滅端,與熒光染料形成 FRET 對,實現(xiàn)靶序列擴增的實時監(jiān)測。其高效淬滅能力顯著降低背景信號,提高檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。
生物傳感器構(gòu)建:
結(jié)合 BHQ-3 的熒光淬滅特性和生物分子的特異性識別能力,構(gòu)建高靈敏度的生物傳感器。例如,用于檢測酶活性、核酸剪切或小分子存在等生物事件。
通過點擊化學(xué)反應(yīng)將 BHQ-3 azide 引入傳感器體系,實現(xiàn)熒光信號的開關(guān)調(diào)控,適用于動態(tài)檢測與實時監(jiān)控。
多色熒光實驗:
BHQ-3 的寬吸收譜與紅色熒光染料匹配,可用于多重標(biāo)記實驗,實現(xiàn)多色信號解耦,同時減少光漂白和背景干擾。
化學(xué)生物學(xué)研究:
通過點擊化學(xué)修飾,將 BHQ-3 azide 固定在特定生物分子上,實現(xiàn)定位淬滅或靶向信號調(diào)控。廣泛用于蛋白質(zhì)-小分子相互作用研究、酶切活性檢測及生物成像等領(lǐng)域。
特點
高效淬滅:在 620-730 nm 波長范圍內(nèi)淬滅效率接近 99%,顯著降低背景熒光,提升信噪比。
寬光譜吸收:覆蓋紅光至近紅外區(qū)域,適用于多種紅色熒光染料的淬滅。
化學(xué)修飾能力強:疊氮基團通過點擊化學(xué)實現(xiàn)與含炔基分子的特異性連接,操作簡便、條件溫和。
生物相容性好:在復(fù)雜生物環(huán)境中穩(wěn)定,適用于體外實驗及活細(xì)胞成像。
光穩(wěn)定性優(yōu)良:具有抗光漂白性能,適合長時間光照環(huán)境下的應(yīng)用。
儲存與操作注意事項
儲存條件:需在 -20℃ 以下冰凍、干燥、避光保存,避免頻繁解凍。
操作規(guī)范:溶液狀態(tài)需盡快使用,中性至弱堿性緩沖條件(pH 7.0-8.5)下穩(wěn)定。
安全提示:僅供科研或工業(yè)應(yīng)用,不可用于人類醫(yī)療或食用。避免反復(fù)凍融,取用后應(yīng)充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,并及時放入冰箱。
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