Cy3-TCO，Cy3反式環(huán)辛烯的概述
2026-04-13
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Cy3-TCO 是一種結(jié)合了 Cy3 熒光染料 和 反式環(huán)辛烯（TCO） 的熒光標(biāo)記探針，廣泛應(yīng)用于生物成像、蛋白質(zhì)互作研究及藥物遞送追蹤等領(lǐng)域。以下是對(duì)其核心特性和應(yīng)用的詳細(xì)介紹：
一、核心特性
熒光性能
激發(fā)波長：550-555 nm
發(fā)射波長：568-570 nm
熒光顏色：明亮橙紅色，光穩(wěn)定性優(yōu)異，適合長時(shí)間曝光實(shí)驗(yàn)（如超分辨顯微鏡）。
光譜優(yōu)勢：與綠色（如 FITC）、遠(yuǎn)紅色（如 Cy5）染料光譜重疊小，便于多色成像中精準(zhǔn)區(qū)分靶點(diǎn)。
TCO 基團(tuán)
反應(yīng)類型：作為親二烯體，可與四嗪（Tetrazine）通過逆電子需求狄爾斯-阿爾德反應(yīng)（iEDDA）快速結(jié)合。
反應(yīng)速率：極快，通常在幾分鐘內(nèi)完成。
反應(yīng)條件：無需金屬催化劑（如銅），避免金屬離子對(duì)生物活性的干擾，兼容活細(xì)胞及活體成像。
溶解性與穩(wěn)定性
溶解性：易溶于 DMSO、DMF 等有機(jī)溶劑，部分條件下可溶于水。
穩(wěn)定性：在 -20℃ 干燥避光條件下可長期保存，但需避免反復(fù)凍融導(dǎo)致降解。
結(jié)構(gòu)式：
二、應(yīng)用領(lǐng)域
活細(xì)胞與活體成像
優(yōu)勢：無銅點(diǎn)擊反應(yīng)特性避免了銅催化劑的毒性，是活體系統(tǒng)（如小鼠模型）和活細(xì)胞動(dòng)態(tài)實(shí)時(shí)標(biāo)記的理想選擇。
應(yīng)用場景：細(xì)胞表面受體標(biāo)記、蛋白質(zhì)定位與追蹤、免疫熒光染色等。
多色熒光成像
優(yōu)勢：Cy3 的橙色熒光與綠色（如 FITC）和遠(yuǎn)紅色（如 Cy5）染料光譜重疊小，可同時(shí)用于標(biāo)記多個(gè)靶點(diǎn)，進(jìn)行共定位研究或多參數(shù)檢測。
應(yīng)用場景：流式細(xì)胞術(shù)、熒光原位雜交（FISH）等。
預(yù)靶向成像
原理：在藥物遞送和診療學(xué)中，可先將帶有四嗪的抗體注射到體內(nèi)靶向腫瘤，后再注射 Cy3-TCO 進(jìn)行快速“點(diǎn)擊"連接和成像。
優(yōu)勢：顯著提高信噪比，降低背景干擾。
蛋白質(zhì)與核酸標(biāo)記
方法：通過 TCO-四嗪反應(yīng)，可將 Cy3 高效地連接到預(yù)先用四嗪修飾的抗體、蛋白質(zhì)或核酸分子上。
應(yīng)用場景：Western Blot、流式細(xì)胞術(shù)、熒光原位雜交（FISH）等。
三、操作規(guī)范
儲(chǔ)存條件
溫度：-20℃ 干燥避光保存。
包裝：避免反復(fù)凍融，建議分裝后保存。
取用規(guī)范
現(xiàn)配現(xiàn)用：將包裝從冰箱中取出，置于干燥器中緩慢升至室溫，打開瓶蓋取用。
惰性氣體保護(hù)：取用后充入氮?dú)獾榷栊詺怏w，封口膜封口，擰緊瓶蓋裝入自封袋，及時(shí)放回冰箱。
實(shí)驗(yàn)防護(hù)
個(gè)人防護(hù)：操作時(shí)穿戴一次性實(shí)驗(yàn)服及手套，避免直接接觸試劑。
避光處理：孵育及檢測過程中全程避光，防止熒光信號(hào)衰減。
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